In processu studiorum geneticarum gerendorum, saepe RNA exempla insufficiens occurrimus, exempli gratia, ad parvas anatomicas oris tumores, etiam ad singulares cellulas, et exempla specificarum generum mutationum quae in cellulis humanarum graduum nimis transcribuntur.Scilicet, pro covido-19 experimento, si obiectis non sunt in loco dextro vel non satis tempore in sampling, magnitudine exempli valde gravis erit, quam ob rem Commissio Sanitatis et Familiae congue ante biduum exivit et probata est, et si exemplum acidi nucleici sex exemplaria non accepit, referre potes.
Sensus reagentia magni momenti est quia hanc problema aut illam quaestionem habemus, quid ergo facimus ut sensus RT-PCR emendare possimus?
Antequam de solutionibus possibilibus disseramus, duos magnas complicationes cum condicione, de qua modo diximus, commememus.
Imprimis de RNA detrimento solliciti sumus cum paucas cellulas incolarum in specimen nostro habemus.Si traditionalis separationis et purgationis methodi adhibentur, ut columnae methodi vel methodi acidi nucleici praecipitatio, magna possibilitas est ut pauca exempla amittentur.Una solutio est moleculae tabellarium addere, ut TRNA, sed etiam tunc, nulla est cautione experimentum recuperandi OK.
Quid igitur melius?Optio bona ad cellulas excultas vel ad specimina microanatomica directa lysin adhibenda est.
Idea cellulas 5 minutas dividere est, RNA in solutionem emittere, deinde reactionem per 2 minuta cessare, tunc lysatam protinus ad transpositionem reactionis transpositam adde, ut nulla RNA pereat, et demum directe cDNA proveniat. in real-time reactionem.
Sed quid si, ob limitatum initium vel parvam quantitatem scopo gene expressionis, omnia RNA rediviva possumus et adhuc non satis exempla praebere, ut signum temporis boni accipiamus?
Hoc in casu, prae-amplificatio gradus valde utilis esse potest.
Sequens est schema ad sensum augendum post transpositionem transpositam.Priusquam incipiamus, amni quaerendum est quem scopos interroget, ut certos primarios pro his scopis ad amplificationem designent.
Hoc effici potest, ut primarium mixtum cum primoribus usque ad 100 paria creando et cyclum reactionem 10 ad 14 temporum.Ideo Magister Mix specialiter designatus ad hanc postulationem opus est ut praeeminentiam cDNA obtineat ampliandam.
Causa ponendi numerum cyclorum inter 10 et 14 est, quia hic numerus cyclorum definitus efficit ut fortuiti inter varios scuta, quae pendet inquisitoribus, qui quantitatitivae notitiae hypotheticae indigent.
Post prae-amplificationem magnam quantitatem cDNA accipere possumus, ita ut detectio sensus in tergo-finis valde melioretur, et etiam exemplum diluere possumus ac plures motus reales-tempus PCR motus ut errores incertis possibilibus excludere possimus.
Post tempus: Apr-11-2023